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血清 or 血漿?ELISA指標(biāo)檢測要怎么選?

血清 or 血漿?ELISA指標(biāo)檢測要怎么選?

全血、血漿、血清的區(qū)別

1. 血清多用于血液生化、**等方面的測定;

2. 血漿多用于凝血等方面的測定;

3. 全血則多用在血細(xì)胞、血沉等方面的測定。



顏色 成分
血液 紅色 血細(xì)胞+血漿
血漿 淡黃色半透明 不含血細(xì)胞

含纖維蛋白原

血清 黃色透明 不含血細(xì)胞

不含纖維蛋白原

小知識:血漿可以通過去除纖維蛋白原等凝血因子形成血清。


血 清

血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。


在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點(diǎn)是與血漿*大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。


為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。  


血清的基本成分

[血清蛋白] 總蛋白、白蛋白、球蛋白、TTT、ZTT。

[有機(jī)鹽] 肌氨酸酐、尿素氮、尿酸、肌氨酸酐·凈化值。

[糖質(zhì)] 血糖、Glycohemoglopin。

[脂質(zhì)] 膽固醇、三甘油脂、β-脂蛋白、HDL膽固醇。

[血清酵素] GOT、GPT、γ-GTP、LDH(乳酸脫水酵素)、淀粉酶、堿性碳酸酶、酸性碳酸酶、膽素脂酶、醛縮酶。

[色素] 膽紅素、ICG、BSP。 

[電解質(zhì)] 鈉(Na)、鉀(K)、鈣(Ca)、氯(Cl)。

[**] 甲狀腺***、甲狀腺刺激***。



血 漿

血漿是離開血管的全血經(jīng)抗凝處理后,通過離心沉淀,所獲得的不含細(xì)胞成分的液體,其中含有纖維蛋白原(纖維蛋白原能轉(zhuǎn)換成纖維蛋白,具有凝血作用),若向血漿中加入鈣離子,血漿會發(fā)生再凝固,因此血漿中不含游離的鈣離子。


血漿的基本成分

[血漿蛋白] 血漿蛋白可分為白蛋白、球蛋白、和纖維蛋白原等幾種成分。

[非蛋白氮] 血中蛋白質(zhì)以外的含氮物質(zhì),總稱非蛋白氮。主要是尿素,此外還有尿酸、肌酐、氨基酸、多肽、氨和膽紅素等。

[無機(jī)鹽] 血漿中的無機(jī)物,絕大部分以離子狀態(tài)存在。陽離子中以Na+濃度*高,還有K+、Ca2+和Mg2+等,陰離子中以Cl-*多,HCO3-次之,還有HPO42-和SO42-等。





血清、血漿如何分離?

血清制備方法

使用無熱原無內(nèi)**的試管或離心管采集血液樣本,將試管或離心管在室內(nèi)溫度下放置自然凝固(視室溫環(huán)境10分鐘到2小時不等)或4℃過夜,分離出血清,(建議傾斜試管或離心管以擴(kuò)大液面的橫截面,使血清能更大程度的分離出來,),2-6℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,立即進(jìn)行測定,建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存,避免反復(fù)凍融,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。


血漿制備方法

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、肝素鈉、枸櫞酸納或檸檬酸鈉作為抗凝劑,使用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液樣本,采集后30分鐘內(nèi),混合10-20分鐘后,2-6℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清液(血漿),建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存,避免反復(fù)凍融。樣本應(yīng)避免溶血或高血脂。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。


血清、血漿分離的注意事項(xiàng)

血清、血漿分離過程中特別需要注意兩點(diǎn):防止溶血和細(xì)胞混入。


1.血液環(huán)境的穩(wěn)定性與保存時間的長短呈反比,細(xì)胞膜的穩(wěn)定性也在下降,在這種情況下,應(yīng)盡快開展血清、血漿的分離,并嚴(yán)格按照操作說明進(jìn)行,避免出現(xiàn)溶血現(xiàn)象,血清、血漿分離后務(wù)必避免反復(fù)凍融。


2.離心速度不能過快,過快的離心速度會造成紅細(xì)胞壓積,容易產(chǎn)生溶血。


3.血液樣品如不能馬上進(jìn)行血清或血漿的分離,則盡量冷藏保存和運(yùn)輸,但是,**不能冷凍,否則血細(xì)胞會形成冰晶造成細(xì)胞破裂而溶血。


小知識:
1.抗凝劑選擇:不同的抗凝劑有其不同的分子構(gòu)型,會對血液中各細(xì)胞的細(xì)胞膜產(chǎn)生不同的作用,有的會增加細(xì)胞膜的穩(wěn)定性,有的會降低細(xì)胞膜的穩(wěn)定性,所以選擇一款合適的抗凝劑至關(guān)重要(檢測前請仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說明書,查看該試劑盒針對抗凝劑是否有特殊要求)。


2.樣品處理不當(dāng)?shù)奈:?/strong>:血液存放過程中溫度過高或反復(fù)凍融對細(xì)胞膜有很大的損害。溫度過高及反復(fù)凍融會使細(xì)胞膜上的結(jié)構(gòu)蛋白構(gòu)象發(fā)生改變,進(jìn)而造成細(xì)胞膜的彈性降低以致破解產(chǎn)生溶血現(xiàn)象,所以用于分離血清、血漿的血液應(yīng)避免反復(fù)凍融。


血清質(zhì)量是怎樣影響檢測的?

1. 溶血:紅細(xì)胞的破裂會引起血漿成分的改變,對一些生化項(xiàng)目如谷草轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶、鉀的測定結(jié)果造成較大的影響。若進(jìn)行抗體類檢測本身血清的顏色會干擾到*終的酶標(biāo)儀讀數(shù)。


2. 脂血:在運(yùn)用比色法和比濁法檢測的項(xiàng)目中,脂血中的乳糜微粒具有散射光的特性不能通過雙波長進(jìn)行消除從而影響檢測結(jié)果。


3. 黃疸:黃疸的血清中含有膽紅素,若樣本放置時間過長或通過氧化劑后膽紅素還可被氧化為膽綠素、膽褐素,這些色素在不同波長范圍具有一定的光吸收,從而影響檢驗(yàn)結(jié)果。


常見的血液生化指標(biāo)與**

常見的血液生化指標(biāo):血糖(GLU)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(Crc)、尿素氮(BUN)、膽固醇(CHO)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽紅素(TBIL)、鎂、鈣等。


常見的**:睪酮(T)、孕酮(P)、雌二醇(E2)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、游離三碘甲腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)等。

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