CD59應(yīng)用

CD59

CD59是近年（1989）才發(fā)現(xiàn)的一種分子量只有18～20kDa的膜性調(diào)節(jié)蛋白。由Sugita等（1988年）首先描述，曾有不同的名稱，如同種限制因子20（homologous restriction factor-20）,保護素（protectin）及膜反應(yīng)性溶破抑制物（membraneinhibitor of reactive lysis,MIRL）等。CD59由103個氨基酸殘基組成，含有單一的N端糖基化位點，其C端借GPI錨固定于細胞表面。CD59分布甚廣泛，已證明皮膚、肝、腎、胰、肺、唾腺、神經(jīng)系統(tǒng)、胎盤以及各種血細胞（紅細胞、**細胞、中性粒細胞及血小板）和精子上均有表達。C59的主要生理功能是，防止MAC對同種或自身細胞的溶解破壞，即同種限制作用（homologous species restriction,HSR)。作用機理為：通過其與C7、C8或C9的結(jié)合而阻止MAC組裝。當(dāng)其與C5b～7復(fù)合物結(jié)合后，可阻止其再與C8結(jié)合；當(dāng)基與C8結(jié)合后，則可阻礙結(jié)合至MAC上的第1個C9分子的鋪展，從而是阻止后繼C9的結(jié)合；而當(dāng)其與MAC中的C9結(jié)合后，又可阻止C9進一步分子的聚合。這樣，在有CD59存在的情況下，在同種或自身細胞的表面便不能順利地完成MAC的全部組裝，或不能組裝成C5b～（9）n復(fù)合物，從而限制了對同種或自身細胞的溶解作用。Rooney等（1991）的報道表明，CD59的這種同種限制作用的機理對保護**內(nèi)的胎兒不被MAC的攻擊也有作用。此外，CD59還促進T細胞粘附與激活，維持精子在女性生殖道內(nèi)的穩(wěn)定性與活性，以及參與PNH發(fā)病機理的作用。

CD59的cDNA已經(jīng)克隆，并確定CD59的基因定位于人的第11號染色體短臂，其核苷酸序列與氨基酸序列相對應(yīng)，并與小鼠的CD59有同源性。

十、SP40/40

自1982年起，生物科學(xué)技術(shù)文獻中先后提出一批術(shù)語。后經(jīng)鑒定它們都是蛋白質(zhì)，且結(jié)構(gòu)類同、功能相近，與補體的末端成分相關(guān)。這些成分有不同的名稱：如Clusterin、SGP-2、SP40/40、TRRM-2、T64、GP111、SP80、CLI、apo-J和NA1/NA2等。Fritz等建議用Clusterin（暫譯為群集素）來概括。

群集素的調(diào)節(jié)作用是在SP40/40這一同源體中發(fā)現(xiàn)的。SP40/40是于70年代末首先在人精漿中發(fā)現(xiàn)的，繼后在腎小球沉積的IC、血液和MAC中也檢出。并由于基常伴隨末端補體復(fù)合物而存在，故認為其是末端補體復(fù)合物的成員之一。SP40/40為血漿中的α糖蛋白，分子量80kDa，由分子量均為40kDa的α和β亞單位所組成，所以稱其為SP40/40?，F(xiàn)知SP40/40由427個氨基酸殘基所組成，α亞單位為222個氨基酸殘基，β亞單位為205個氨基酸殘基。α和β亞單位借3個二硫鍵相連接而構(gòu)成一異二聚體。兩個亞單位的氨基酸組成除甘氨酸外，其余均很相似，但氨基酸的序列則相差明顯。人血漿中SP40/40的含量為35～105μg/ml（平均62μg/ml），但在人精漿中卻可高達15mg/ml，認為這與保護精子的活性有關(guān)。

SP40/40是MAC組裝的調(diào)節(jié)蛋白。它可與C5b～7、C5b～8或C5b～9結(jié)合，對MAC的組裝起抑制作用，從而可防止MAC的溶細胞作用。此外SP40/40與S蛋白還具有協(xié)同作用，可使MAC變?yōu)榭扇苄缘亩ト芗毎饔谩，F(xiàn)知C8與SP40/40的結(jié)合部位是C8β、C9與SP40/40的結(jié)合部位是C9b。

十一、同種限制因子

同種限制因子（homologousrestriction factor,HRF），又稱C8結(jié)合蛋白（C8bp）。為Zalman等（1986）用C9-Sepharose親和層析從人紅細胞膜上分離的一個能與C8、C9結(jié)合并參與C9階段同種限制性的膜蛋白，通過GPI錨固定于細胞膜表面。新鮮紅細胞膜上的HRF分子量為65kDa，而在冷凍的陳舊性紅細胞膜上則降解為38kDa。HRF存在于正常人的紅細胞、中性粒細胞、單核細胞、**細胞及血小板上。HRF對反應(yīng)性溶血作用的嚴格的種屬限制性。如經(jīng)抗HPF抗體處理的人紅細胞對人C8、C9的反應(yīng)性溶血作用敏感性增高，而對8種動物來源的C8、C9的反應(yīng)性溶血作用則不敏感。體外試驗表明，HRF能抑制C9與C8的結(jié)合及C9聚合，從而阻止MAC插入自身細胞的膜脂質(zhì)雙層及細胞溶解。HRF可能還與**細胞殺（C9RP）介導(dǎo)的人大顆粒**對羊紅細胞和PNH患者紅細胞的ADCC作用。

關(guān)于上述11種補體調(diào)節(jié)分子的特性及生物學(xué)活性見表5-2

表5-2　補體調(diào)節(jié)分子的特性及生物學(xué)活性