RNA-seq，也叫轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)，就是把mRNA,smallRNA,and NONcoding RNA等等，其中一些用高通量測(cè)序技術(shù)把它們的序列測(cè)出來(lái)，以此來(lái)檢測(cè)它們的表達(dá)水平。
原理及過(guò)程：
轉(zhuǎn)錄組是某個(gè)物種或者特定細(xì)胞類(lèi)型產(chǎn)生的所有轉(zhuǎn)錄本的集合。轉(zhuǎn)錄組研究能夠從整體水平研究基因功能以及基因結(jié)構(gòu)，揭示特定生物學(xué)過(guò)程以及**發(fā)生過(guò)程中的分子機(jī)理。
先將樣品提取總RNA，在這之后，除去rRNA（對(duì)于真核生物，用帶有Oligo(dT)的磁珠富集mRNA，對(duì)于原核生物，用試劑盒去除rRNA），向得到的mRNA中加入Fragmentation Buffer使其片斷成為短片段，再以片斷后的mRNA為模板，用六堿基隨機(jī)引物(random hexamers)合成cDNA**鏈，并加入緩沖液、dNTPs、RNase H 和DNA polymerase I 合成cDNA**鏈，經(jīng)過(guò)QiaQuick PCR試劑盒純化并加 EB緩沖液洗脫經(jīng)末端修復(fù)、加堿基A，加測(cè)序接頭，再經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳回收目的大小片段，并進(jìn)行PCR擴(kuò)增，從而完成整個(gè)文庫(kù)制備工作，構(gòu)建好的文庫(kù)用Illumina HiSeq2000進(jìn)行測(cè)序。
服務(wù)內(nèi)容：大數(shù)據(jù)分析，整體課題的分解，真實(shí)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告及分析。